一、甘草提取物Radix Glycyrrhizae.P.E、甘草酸Glycyrrhizic acid、12%、20%、25%。

二、甘草提取物资料：甘草 

[药材来源] 

本品为豆科植物甘草Glycirrhiza uralensis Fisch，胀果甘草G.infOAta BAT.或光果甘草G.glabra L的干燥根及根茎。春、秋二季采挖，除去须根，晒干。甘草分布于东北、华北、西北；胀果甘草分布于甘肃、新疆；光果甘草分布于甘肃、青海、新疆。 

[药材质量] 

1．我国药典2000年版甘草项下规定，本品含甘草酸不得少于2.0%。 

2．乌拉尔甘草Glycirhiza uralensis Fisch是我国药材商品的主流，但质量差异较大。内蒙古鄂前旗（沙地）、鄂前旗（梁地）、杭锦旗（滩地）的甘草苷含量分别为5.66%、3.96%和5.44%。（1）

3．不同产地甘草酸含量比较（2）

新疆甘草3.326%，内蒙古甘草含量为2.525%，内蒙古梁外为4.317%，东北洮安为4.719%，甘肃敦煌为4.567%，新疆吐鲁番为4.448%。

4．不同产地甘草中黄酮、香豆素总含量比较（3）

不同产地甘草中五种黄酮和四种香豆素含量，结果乌拉尔甘草中总含量为：山西临县6.446%，山西石楼5.030%，内蒙古杭锦旗4.541%，陕西志丹4.317%，陕西定边3.279%，甘肃敦煌1.276%，吉林长岭1.171%，新疆和静1.659%。胀果甘草中总含量为：新疆焉耆1.313%，甘肃金塔0.529%，甘肃安西0.733%，甘肃敦煌0.688%。

5．甘草不同采收季节与甘草酸含量关系（4）

甘草酸含量随季节变化而变化，春草大于秋草，秋草大于夏草。不同生长年限甘草的质量比较，3-4年生根，含甘草酸6.98-10.52%，明显高于1-2年生根5.13-6.76%。

6．另据报道，HPLC测定黑龙江人工栽培1、2、3年生甘草中甘草酸含量，结果为1年生1.2280%，2年生1.7961%，3年生为1.8043%。（5）

7．三个产地的甘草中甘草酸含量（%）（6）

8．甘草及甘草膏中甘草酸的含量（%）（7）

9．不同品种中甘草不同部位甘草酸含量测定（%）（8）

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[产品规格]

甘草提取物甘草酸的含量要求为12%、20%、25%。（HPLC检测）

甘草提取物甘草次酸的含量要求为98%。（HPLC检测）

[主要成分]

1．三萜类：甘草酸、24-羟基甘草次酸等。

1.1．甘草酸（Glycyrrhizic acid）：异名甘草甜素、甘草皂苷，分子式C42H62O16，分子量822.92，冰醋酸结晶为无色柱状结晶，mp220℃（分解），易溶于热的稀乙醇，几乎不溶于无水乙醇或乙醚。甘草酸在植物中常以钾、钙盐形式存在，是甘草甜味成分。

1.2．甘草次酸（Glycurrhetinic acid）：为甘草酸的水解产物，分子式C30H46O4，分子量470.64，针状结晶（醋酸-乙醚-石油醚），mp297℃-298℃，易溶于乙醇、氯仿。

2．黄酮类：甘草黄酮、异甘草黄酮、甘草素、异甘草素等。

2.1．甘草素（Liquiritigenin）：异名甘草黄酮配质，分子式C15H12O4，分子量256.25，一水合物为无色针状结晶（乙醇），mp207℃。

2.2．甘草苷（Liquiritin）异名甘草黄酮：分子式C21H2209，分子量418.39，一水合物（稀乙醇或水），mp212℃-213℃。

3．生物碱类：为四氢喹啉类化合物。

4．多糖类：为中性多糖。

[提取工艺]

1．甘草酸的提取

1.1．煎煮法：（9）

甘草根粗粉，用水煮沸提取3次，合并提取液，浓缩至体积的1/5，搅拌下加入浓硫酸至不再析出沉淀为止，静置过滤，收集棕色沉淀，用水洗涤数次，在60℃以下干燥，得甘草酸粗品。

1.2．浸泡法（10）

1.2.1．浸泡法A：

甘草切碎成粗粉，加入5倍量的冷水浸泡2d，浸提液过滤，再加入3倍量的冷水浸泡12h，过滤，合并2次滤液，浓缩，浓缩液中加入乙醇低温放置2d，将混合液过滤，浓缩得黑褐色粘稠抽提液。抽提液中含甘草甜素约为15%，干燥失重在35%以下，可作为食品添加剂。

上述乙醇液回收乙醇浓缩，浓缩液喷雾或真空干燥，得干燥甜素粗品，含量约20-25%，粗结晶在稀乙醇溶液中重结晶。即可。得到精制的甘草甜素 。水提取收率24.6%。

1.2.2．浸泡法B：

甘草粗粉，加适量水浸泡2次，每次20h，过滤，滤液用H2SO4调PH值1.9冷置，过滤后再用甲醇溶解提取，甲醇提取液用浓NH4OH调7.5-8，减压蒸干，得糖浆状物，用HAc溶解，静置，放入晶种，过滤，结晶物用HAc洗涤，减压干燥，得甘草酸。

1.3．大孔树脂法（11）

浸泡法所得糖浆物，溶于适量水中，调PH6.0-6.5，通过Amberlite XAD-8树脂柱，依次以水、10%乙醇洗脱，洗脱液减压蒸干，得淡黄色甘草酸。

 1． 甘草中甘草酸的提取及甘草酸铵盐制备（12）

甘草洗净切碎，用6倍量0.5%的氨水浸提，浸提完成后过滤，真空浓缩至原体积的1/5，用浓硫酸调节PH值3，使甘草甜素沉淀析出，得粗制甘草甜素，用水洗涤至PH中性，于60℃干燥得粗甘草甜素粉末，粉末状甘草甜素加入4倍量乙醇加热回流3h，过滤后，再加入2倍量乙醇回流，合并回流液，加入10g活性炭回流脱色30min，冷却后再滤除活性炭，向滤液中通入氨气至无固体析出为止，（PH=7-7.5），过滤收集沉淀并用少量乙醇洗涤，洗涤后的沉淀在室温下干燥得甘草甜素三铵盐。将甘草甜素三铵盐用等量的冰醋酸重结晶二次，得到淡黄色的甘草甜素单铵盐，继续用4倍量80%乙醇加热溶解，甘草甜素单铵盐并用活性炭脱色，冷却，过滤浓缩，析出白色晶体即为甘草甜素结晶。

2． 甘草中甘草酸的提取与甘草单钾盐的制备（12）

甘草酸粗品，用丙酮回流提取三次，滤除不溶杂质，放冷，搅拌下加20%KOH乙醇液至弱碱性，放置，析晶，过滤。结晶物为甘草酸三钾盐，室温干燥，磨粉加水、HAc热溶，放冷析晶，过滤，得甘草酸单钾盐，75%乙醇重结晶，得甘草酸单钾盐纯品。

3． 甘草中甘草酸的水解与甘草次酸的制备（12）

甘草酸单钾盐加5%H2SO4，加热水解10h，抽滤，得白色甘草次酸粗品，水洗中性，干燥后加CHCl3热溶，趁热过滤，放冷，通过Al2O3柱层析，用CHCl3洗脱，回收溶剂，放置，析晶，EtOH重结晶，甘草酸次晶结晶。

5．甘草中甘草苷、异甘草苷等黄酮类成分的提取分离（12）

5.1.混合溶剂提取法：

甘草根干燥粉碎后，以水、己烷、丙酮混合溶剂（10：1：4）热回流抽提，提取液滤清后蒸发去有机溶剂，水相以正丁醇萃取数次，合并正丁醇溶液，减压浓缩去正丁醇至干，残余物为甘草苷及其它黄酮化合物的混合物。

5.2乙醇提法：

甘草根粉，用80%乙醇渗漉，渗漉液浓缩，糖浆状物，用水热溶后，用EtOAc萃取，水层用n-BuOH提取，n-BuOH层加热回收，得浅棕色固体，聚酰胺柱（60-80目）EtOH-H2O梯度洗脱，流份2，硅胶中压柱层析，CHCl3-MeOH梯度洗脱，分别得异芸柄花苷和甘草苷，流份3，Sephadex LH-20柱层析，制备薄层（CHCl3-MeOH8：2）得异甘草苷，流份4，硅胶夹板层析，低压聚酰胺层析，制备层析，分别得甘草素-7、4，-2葡萄糖苷和新异甘草苷。

4． 甘草中甘草葡聚糖的分离纯化（13）

甘草根茎，用EtOH回流提取，过滤，残渣干燥后沸水提取至H2SO4-C6H5OH反应阴性，过滤，残渣2%Na2CO3水溶液10℃以下提取，碱提取液，中和，离心，上清液加乙醇沉淀，抽滤，沉淀物，加水溶解，三氯醋酸除蛋白，离心，上清液透析，EtOH沉淀，抽滤，沉淀用Me2CO和 Et2O洗涤，棕色粗品，Cellex-D（cl）型柱层析，H2O洗脱，旋光检测，分部收集到一组分，该组分经SephadexG-100LDB柱层析，0.2mol/LnaCl水溶液展开示差检测，收集高峰部分，透析，冷冻干燥，白色粉状组分（甘草葡萄聚糖GBW）。

5． 胀果甘草中甘草查耳酮的提取与精制（14）

胀果甘草粉末，用氯仿回流提取，氯仿提取液蒸去溶剂，得棕黄色粉末，拌少量聚酰胺粉上柱，进行聚酰胺柱层析，依次用水、稀乙醇洗脱，30%-50%乙醇洗脱的黄色色带，回收溶剂，粉末上Al2O3柱层析，氯仿洗脱，黄色流份合并，浓缩，放置，过滤，析晶，过滤，结晶物，用乙醇-水重结晶，得桔黄色针状结晶，甘草查耳酮。

6． 新疆甘草中甘草酸提取最佳工艺条件

甘草饮片粗粉，加水提取两次，第一次15倍量，提取1.5h，第二次10倍量，提取1h，

过滤，合并两次的水提液，浓缩至1/5量，待冷却后，边搅拌边滴加浓H2SO4至不在析出沉

淀为止，（调PH=1），离心，沉淀物水洗中性后，60℃以下干燥，粉碎得甘草酸粗品。

[质控要点]

    1.甘草药材因甘草酸含量差异较大，要检测药材的含量，取含量高的药材作为提取原料。

    2.甘草水煎煮提取，带入大量的杂质，用浓硫酸酸沉时要确定一个确定的PH值终点，浓缩的程度及加入的酸量要掌握好，酸要加入冷的浓缩液中，并注意搅拌和安全。

[功效与应用]

甘草具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、调和诸药的功效。用于脾胃虚弱，倦怠乏 力，心悸气短，咳嗽痰多，缓解药物毒性。

1.解毒作用：甘草甜素或其钙盐有较强的解毒作用，对白喉毒素、破伤风毒素有较强的解毒作用，对于一些过敏性疾患、动物实验性肝炎、河豚毒及蛇毒亦有解毒作用。其解毒作用机制可能是多方面的，通过物理、化学方式的沉淀、吸附与结合，加强肝脏的解毒机能以及甘草甜素的水解产物葡萄糖醛酸也是解毒作用的有效成分。甘草甜素有抑制艾滋病病毒的作用。
    2.抗炎及抗变态反应：甘草次酸对大鼠的棉球肉芽肿、甲醛性浮肿，结核菌素反应、皮下肉芽囊性炎症均有抑制作用。甘草酸铵、甘草次酸钠能有效地影响皮下肉芽囊性炎症的渗出期及增生期，其作用强度弱于或接近于可的松。甘草酸的各种制剂之抗炎作用，以琥珀酸盐的活性较高，但毒性亦大。甘草抗炎抗变态反应的原理尚未完全阐明。
    3.甘草有祛痰作用，能促进咽喉及支气管的分泌，使痰容易咯出。
    4.甘草次酸衍生物对豚鼠及猫的实验性咳嗽均有显著的镇咳作用。
    5.甘草的各种制剂对大鼠实验性胃溃疡有明显的抑制作用。甘草的水提取物有保护胃粘膜，治疗胃溃疡的作用。据临床与药理研究观察，甘草水提物能增加胃粘膜细胞的“已糖胺”成分，使胃粘膜不受损害。
    6. 对胃液分泌的影响：甘草流浸膏灌胃后，能吸附胃酸，故能降低胃酸浓度，但吸收后也能发挥作用。对基础分泌量亦有抑制作用。
    7.解痉：甘草煎剂、流浸膏对动物离体肠管均有抑制作用，对乙酰胆碱、氯化钡、组织胺等引起的肠痉挛有解痉作用。甘草对动物离体肠管及在体胃均有松弛作用。
    8.甘草对于动物实验性肝损伤，使其肝脏变性和坏死明显减轻，肝细胞内蓄积的肝糖元及核糖核酸含量大部恢复或接近正常，血清谷丙转氨酶活力显著下降，表明甘草具有抗肝损伤的作用。甘草甜素和甘草次酸能防治大鼠实验性肝硬化的发生。
    9.肾上腺皮质激素样作用：甘草能使多种动物的尿量及钠的排出减小，钾排出增加，血钠上升，血钙降低，肾上腺皮质小球管萎缩。甘草能使尿中游离型17-羟皮质类固醇排泄增加，结合型减少，小剂量表现胸腺萎缩，肾上腺重量增加，束状层幅度加宽，肾上腺维生素C含量降低等。甘草能显著增强和延长考的松的作用。甘草产生肾上腺皮质激素样作用的原理，有人认为甘草次酸的化学结构与肾上腺皮质激素相似，作用也相似，系一种直接作用；也有人认为是一种间接作用即甘草次酸抑制了肾上腺皮质固醇类在体内的破坏，因而血液中皮质类固醇含量相应增加，而呈现较明显的肾上腺皮质激素样作用。
    10.甘草有对抗乙酰胆碱的作用，并能增强肾上腺素的强心作用。
    11.抗癌：甘草次酸对于大鼠实验性骨髓瘤及腹水肝瘤均有抑制作用。对小鼠艾氏腹水癌有抑制作用。
    12.甘草与芫花合用有相反作用：二者共浸组的毒性较分浸组显著增高，芫花与甘草同用，利尿、泻下作用受到抑制，能增强甘草毒性。 保肝解毒，抗炎抗变态反应，抗肿瘤抗病毒，肾上腺素样作用。可以作为食品甜味剂。

甘草次酸具有抗菌、抗肿瘤及肾上腺皮质激素样作用，可制成抗炎抗过敏制剂，用于治疗风湿性关节炎、气喘、过敏性及职业性皮炎、眼耳鼻喉科炎症及溃疡等。可以治疗男性中老年前列腺炎。

甘草酸具有肾上腺皮质激素样作用，能抑制毛细血管通透性，减轻过敏性休克的症状。可以降低高血压病人的血清胆醇。

甘草酸是甘草甜味的有效成分，通常使用的是其水溶性的盐，称为干草甜素。它的特点是高甜度、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低。因此，在医药、食品、化妆品等行业使用广泛。
    甘草酸甜素能与多种生物碱、抗生素、氨基酸等生成复盐或复方制剂，具有协同、增溶、增加药物稳定性、提高生物利用度及降低毒副作用的功效。甘草酸的许多金属盐，人体可适当吸收，不易造成元素的积蓄中毒。因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药。日本学者对甘草酸甜素的抗病毒性进行了筛选，表明它对艾滋病毒的增殖及对细胞变性有抑制作用。1986年日本报道甘草对艾滋病毒的抑制率高达98%，因此，甘草被称为战胜AIDS病的"仙草"。
    现代研究证明，甘草酸是甘草中最重要的有效成分之一。具有抗炎、抗病毒和保肝解毒及增强免疫功能等作用。由于甘草酸有糖皮质激素样药理作用而无严重不良反应，在临床中被广泛用于治疗各种急慢性肝炎、支气管炎和艾滋病。还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。

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（14）上海药物所 中草药有效成分提取与分离 上海科技出版社 1983；327

三、甘草提取物提取设备：

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